Cara mempersiapkan sampel lemak untuk isolasi stem cell

Pengumpulan jaringan adiposa

1. Persiapkan kotak pendingin dan isi dengan es batu.
2. Persiapkan 4 tabung 50 ml yang masing-masing berisi 25 mL DMEM:F12.
3. Pindahkan jaringan adiposa segar (5-10 gram) yang telah diambil oleh dokter bedah/operator ke dalam tabung 50 ml.
4. Setelah pengumpulan, letakkan tabung 50 ml ke dalam lemari biosafety di lab kultur sel.
5. Pindahkan jaringan adiposa padat dari setiap sumber adiposa ke dalam petri dish / cawan petri.
6. Cincang jaringan adiposa sekecil mungkin menggunakan pisau bedah atau gunting jaringan di atas petri dish.
7. Buang pembuluh darah kecil dari jaringan adiposa yang telah dicincang.
8. Pindahkan jaringan adiposa ke dalam tabung 50 mL.
9. Cuci jaringan adiposa untuk membersihkan darah dan kotoran lainnya menggunakan PBS + 1% AA
10. Sentrifugasi tabung 50 ml dengan kecepatan 600 x g selama 5 menit.
11. Buang PBS dengan pipet serologis 10 mL.
12. Perkirakan volume jaringan adiposa yang tersisa di dalam tabung konis (misalnya, 3,5 mL) dan kemudian tentukan volume yang akan anda gunakan pada tahap selanjutnya yaitu tahap pencernaan jaringan (misalnya, 5 mL, 10 mL).